α-淀粉酶(枯草桿菌)使用的一些常用技術分析
更新時間:2017-08-21 點擊次數:2097
α-淀粉酶(枯草桿菌)合適的底物分子是酚類,以及芳香性和脂肪性的胺類。它們催化的過程是底物的單電子氧化,生成相應的活性自由基。酶分子中含有4個銅原子構成的簇作為催化核心,實施氧化還原過程。在催化核心中銅原子的相互作用引起了強烈的電子吸收,產生了典型的藍色。為α-淀粉酶(枯草桿菌)催化的循環過程,1分子的氧被還原為2分子的水同時4個底物分子氧化產生4個自由基,這些活性的中間物隨后轉變為二聚體、寡聚體和高聚物。
除了漆酶80498-15-3在工業中巨大的應用前景外,目前也被用有機合成中。其中一個很重要的方面是闡明漆酶的作用機制和開發新的中介分子。
因為α-淀粉酶(枯草桿菌)已超過地應用木質素的去除,漆酶的應用從原先是針對酚類拓展到其它的非酚類的取代基,例如圖4b中羥基變為酮基。漆酶和可以將寡糖中的糖基C6的羥基氧化為羧基。在這些有機合成中,漆酶的催化機制可分為3種類型:一是由化合物催化的電子轉移;二是由化合物催化的自由基轉移反應;三是圖化合物催化的離子氧化反應。一般在水中的Cu+2/Cu+的離子氧化還原電位僅0.15 V,而漆酶催化的離子氧化反應,相應的電位增大為0.6~0.8V。
α-淀粉酶(枯草桿菌)催化的*反應條件;
α-淀粉酶(枯草桿菌)的底物多數是溶解度很差的分子,因此,在選擇反應條件時,經常需要使用有機溶劑或將漆酶固定化。
在催化雌二醇氧化反應中,選用的兩相的體系,水-乙酸乙酯。就這樣的體系而言,優點是酶在水中比較穩定不易失活,缺點是兩相反應,需經過底物的分配,速度慢。如果選用和水能混合的有機溶劑,成為均相反應,zui大的問題是酶的穩定性差,酶活性降低。利用去垢劑構出的反相微團,可能維持酶的活性。
α-淀粉酶(枯草桿菌)將酶固定化是目前常用的穩定酶的一種方法,可以在有機溶劑中仍不使酶失活。有趣的是,在使用固定化酶時曾發現,有機溶劑四氫-2-萘醇可影響產物的比例,這似乎提示了有機溶劑影響了酶的特異性。