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  • 2019

    12-18

    常見菌類污染情況圖片1.桿菌常見的有大腸桿菌,長度通常在2-5um左右。2.球菌常見的有葡萄球菌,直徑通常在1-2um左右。3.霉菌常見的有毛霉,菌絲寬2-10um左右,長度短則幾十um,長則可達幾mm。以上3種是細胞培養過程中常見的菌類污染,其共性是增殖快,適應能力強,很難*,一般如果確認培養細胞有以上污染,建議盡快丟棄,并檢查相關試劑和培養箱是否有污染,確認沒有后再重新復蘇。那么細胞如果還是不幸污染了,那又該怎么辦呢?我把細胞污染分為早期和晚期兩種。早期污染是細胞狀態變差...

  • 2019

    12-11

    ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。實驗顯示,ELISA試劑盒經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物...

  • 2019

    12-11

    無論新人還是熟手,細胞污染都是必須要面對的,那對于細胞污染,我覺得zui好的措施就是預防為主,因為細胞一旦污染,想救是非常困難的,即便救活,細胞狀態也會差很多。所以我先來說下我是怎么預防細胞污染的。生物安全柜是處理細胞的主要場所,也是細胞發生污染的主要場所,所以安全柜的正確使用是預防細胞污染的di一步。那么安全柜內需要注意的小細節有哪些呢?首先,所有進入安全柜的東西在進入前都要用75%的酒精消毒。特別要注意的是我們的手,只要出了安全柜,再進入安全柜前都要噴75%的酒精消毒。實...

  • 2019

    12-5

    一、肉眼觀察以下幾項:1.細胞瓶身:如果瓶身上沒有裂縫,正常;如果瓶身上有裂縫,則污染幾率非常大。2.培養基顏色:如果培養基顏色是紅色或者粉色,正常;如果是橙色,則可能是污染或者細胞過密;如果是黃色,則污染幾率非常大。3.培養基澄清度:如果培養基澄清,正常;如果有少許漂浮物,則可能是污染或者有細胞凋亡;如果培養基很渾濁,甚至出現絮狀物,則污染幾率非常大。二、進行顯微鏡下觀察(通常觀察前需先靜置細胞1-2h)顯微鏡下可以清晰觀察到細胞是否有菌類污染,菌類污染通常分為桿菌、球菌和...

  • 2019

    11-19

    干粉培養基是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。干粉培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管,均改制成粉末。干粉培養基若...

  • 2019

    11-18

    根據賓夕法尼亞大學佩雷??爾曼醫學院的一項新研究,隨著細胞老化,它們排出有害垃圾的能力下降。研究結果表明,老年神經元中自噬的惡化-從未復制過的細胞和它們所居住的尸體一樣古老-可能是一系列神經退行性疾病(如肌萎縮側索硬化癥,阿爾茨海默氏癥)的危險因素,和帕金森氏癥。使用來自年輕和老年小鼠的神經元的活細胞成像,生理學教授ErikaHolzbaur博士和作者,Holzbaur實驗室的博士后研究員AndreaStavoe博士本周在eLife上發表了他們的研究。自噬的重要性在2016年...

  • 2019

    10-31

    酶聯免疫吸附法(ELISA)由于其易于操作,可以簡單地回答樣本中有多少蛋白質/多肽/抗體這一基本問題,是實驗室比較常用的一種檢測方法。而這種簡單的分析方法的核心,就是標準曲線。沒有它,我們的實驗就變成了一個二元的“是/不是”測試。有了它,我們可以深入研究生物反應的細節。那么,是什么使得標準曲線如此強大呢?讓我們在ELISA的背景來討論這個問題。簡單地說,標準品就是一系列已知目標蛋白數量的陽性對照。例如,如果對人類IgG進行ELISA檢測,標準曲線將包含逐漸減少的已知量的人類I...

  • 2019

    10-25

    辛辛苦苦提完RNA,逆轉錄后一個個孔加完引物和模板,Z后進行RT-PCR,你以為這樣就可以美滋滋地坐等結果了?等到一幅下面這樣的結果圖,不知道對于剛接觸RT-PCR的你來說內心是否是崩潰的?這是啥?怎么看?別急,讓我慢慢跟你介紹,看完后你就能準確的分析出你的RT-PCR結果了。「這里以7500軟件為例進行介紹」1.首先設置好內參和對照組「在AnalysisSettings處」,一般我們在上機前會對應設置好的,如果設置好的話可以直接跳至第3點。如果沒有設置好的話是需要重新進行設...

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