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  • 2019

    10-14

    實驗方法原理基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至94℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應做準備;②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:DNA模板--引物結合物在Taq酶的...

  • 2019

    9-19

    蛋白抗體是什么?蛋白抗體升高是什么原因引起的?專家們給我們做出了介紹:甲狀腺球蛋白(TG)是由甲狀腺濾泡上皮分泌,主要儲存在甲狀腺濾泡腔,是甲狀腺激素合成的場地。在正常情況下有很少量的甲狀腺球蛋白釋放入血,甲狀腺球蛋白正常值蛋白抗體(TGA)的存在。因為甲狀腺結合球蛋白可以影響血清甲狀腺球蛋白的測定。蛋白抗體是自身免疫性甲狀腺疾病病人血清中的一種常見自身抗體。它主要由IgG1、IgG2和IgG4組成,少部分為IgA和IgM。一般認為TGAb對甲狀腺無損傷作用。TGAb與甲狀腺...

  • 2019

    9-10

    巴氏芽孢桿菌(Bacilluspasteurii)產脲酶,尿素酰胺水解酶,近來受到很多研究人員追捧,那如何培養這菌株成了很多大家關注的問題,下面就一一詳細介紹巴氏芽孢桿菌如何培養說明巴氏芽孢桿菌培養溫度:30℃培養時間:18-24小時培養基:.CASOAGAR+尿素(20克/升)酪蛋白胨15克大豆蛋白胨5克氯化鈉5克瓊脂20克蒸餾水1升PH7.3斜面菌種和凍干菌種應在2-8℃保存。凍干活化,干粉要全部用完,不能保留,用0.1-0.2ml的培養液或者無菌水溶解,接種在2支斜面上...

  • 2019

    9-6

    在整個PCR體系中,引物占有十分重要的地位。PCR的特異性要求引物與靶DNA特異結合,不與其他非目的的DNA結合,PCR的靈敏性要求DNA聚合酶能與引物進行有效的延伸,可見引物設計好壞與PCR結果密切相關。一、PCR引物設計原則1、引物長度一般在15-30bp引物長度一般為15-30bp,常用的為18-27bp,但不應大于38bp,因為過長會導致其延伸溫度大于74℃,不適于TaqDNA聚合酶進行反應;2、引物GC含量一般為40%-60%引物GC含量一般為40%-60%,以45...

  • 2019

    8-30

    流式結果圖有4種類型,分別為:1.直方圖2.散點圖3.等高線圖4.密度圖下面一一為大家介紹1.直方圖(Histograms)a.橫坐標代表熒光信號或散射光信號相對強度,可以是線性或對數坐標。b.縱坐標一般是相對細胞數。直方圖適用于分析處理周期(如下圖)直方圖分析數據注意事項:①不能比較不同標記之間的表達量。如一號樣本單標記CD133、二號樣本單標記CD44,那么CD133與CD44表達量不能用直方圖進行比較。②直方圖的形狀(直方圖的高度及寬度)取決于儀器的類型、處理軟件和樣本...

  • 2019

    8-20

    ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。下面分析ELISA試劑盒操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法。目前用于紡織退漿的淀粉酶主要ELISA試劑盒,淀粉糖化酶(β-淀粉酶),胰淀粉酶,麥芽淀粉酶等。我國主要采用耐熱性強的枯草桿菌淀粉酶即α-淀粉酶(枯草桿菌),β淀...

  • 2019

    8-16

    一、實驗過程中需要注意的問題①蛋白樣品的提取及蛋白含量的檢測蛋白樣品的提取咱們*是按照試劑盒說明書來做的,步驟沒有什么講的,但是因為蛋白樣品的好壞直接決定了是否能做出來蛋白條帶,這就好比蓋房子所需要的磚頭一樣,一定要務必認真。②儀器準備清洗玻璃板:玻璃板的正確拿法應該是拿住玻璃板的左右兩側不要用手拿上下兩端,避免手套上面的臟東西順著水流流到玻璃板上,玻璃板請一定務必清洗干凈,不干凈的玻璃板上面的殘留物可能會影響凝膠之間的化學反應,導致膠出現問題,對后面的結果影響很大。玻璃板放...

  • 2019

    8-1

    軟瓊脂(softagar)實驗一般用來檢測細胞的集落形成能力。現在這種方法越來越多的用于分離癌細胞,也可以用來確認癌細胞是否具有癌化特性,為進一步做腫瘤小鼠移植模型奠定理論基礎。該方法看似簡單,但如果細節掌握不好,往往導致實驗失敗或數據缺乏說服力。如果你曾經在這個實驗上栽了跟頭,請不妨在如下幾個方面進行嘗試:1.要確保在整個實驗過程中所使用的瓊脂處于*液體狀態(80℃),尤其是在做基底時,如果瓊脂凝固過快會導致基底不均一;2.做瓊脂基底是應避免產生小氣泡,一旦有小氣泡產生,應...

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